Antíoco, rey de Comagena, una región de Siria, anexa al Imperio Romano, que sirve fielmente a Tito y conserva su título real, está enamorado de Berenice. Lleva mucho tiempo esperando la oportunidad de hablar con Berenice y averiguar cuál es su decisión: si está lista para convertirse en la esposa de Tito, entonces Antíoco se irá de Roma. Cuando se encuentra con ella, Antíoco admite que la ha amado durante los cinco años desde que la conoció, pero Berenice le responde que siempre amó solo a Tito y que el amor es más precioso para ella que el poder y la corona del emperador.
Berenice habla con su confidente Foinika, y ella sugiere que será difícil para Titus eludir la ley. Pero Berenice cree en Tito y su amor y espera a que sea recibida por el "senado arrogante".
Mientras tanto, Titus le pregunta a su confidente Pauline qué piensan en Roma sobre él y Berenice. El emperador no está interesado en la opinión de una corte servil y nobles: siempre están listos para soportar cualquier capricho de César, ya que soportaron y aprobaron "toda la bajeza de Nerón". Tita está interesada en la opinión de la gente, y Paulin le responde que a pesar de que Berenice es digna de belleza como corona, a nadie en la capital "le gustaría llamarla emperatriz". Ninguno de los predecesores de Tito violó la ley de matrimonio. E incluso Julio César, que amaba a Cleopatra, "no podía llamar al egipcio su esposa". Tanto la cruel Calígula como el "vil" Nerón, "habiendo corregido todo lo que la gente ha estado honrando durante siglos", respetaron la ley y "no vieron el vil matrimonio con ellos". Y el antiguo esclavo Félix, que se convirtió en el procurador de Judea, estaba casado con una de las hermanas de Berenice, y a nadie en Roma le gustaría que aquella cuya hermana había llevado al esclavo de ayer a su marido subiera al trono. Titus admite que luchó durante mucho tiempo con amor por Berenice, y ahora que su padre ha muerto y una pesada carga de poder le ha acostado sobre los hombros, Titus debe abandonarse a sí mismo. La gente lo está mirando, y el emperador no puede comenzar su gobierno con la violación de la ley, Titus decide contarle todo a Berenice, tiene miedo de esta conversación.
Berenice se preocupa por su destino: el duelo de Titus por su padre terminó, pero el emperador guarda silencio. Ella cree que Titus la ama. Titus sufre y no se atreve a decirle a Berenice que debe abandonarla. Berenice no puede entender lo que ha hecho. Tal vez tiene miedo de violar la ley? Pero él mismo le dijo que ninguna ley podía separarlos. ¿Quizás Tito se enteró de su reunión con Antíoco y los celos hablaron en él?
Tito se entera de que Antíoco se irá de Roma, y está muy sorprendido y molesto: necesita a su viejo amigo, con quien lucharon juntos. Tito le dice a Antíoco que debe separarse de Berenice: es César, quien decide el destino del mundo, pero no puede entregar su corazón a la persona que ama. Roma acepta reconocer a su esposa solo como romana, "cualquiera, miserable, pero solo por su sangre", y si el emperador no le dice adiós a la "hija de Oriente", entonces "delante de ella, la gente enojada exigirá su expulsión". Tito le pide a Antíoco que le informe de su decisión. Quiere que su amigo, junto con Berenice, se vaya a Oriente y siga siendo un buen vecino en sus reinos.
Antíoco no sabe qué hacer: llorar o reír. Espera que en el camino a Judea pueda convencer a Berenice para que se case con él después de que César la rechazara. Arshak, su amigo, apoya a Antioch: estará al lado de Berenice y Titus está muy lejos.
Antioch intenta hablar con Berenice, pero duda en decirle directamente lo que le espera. Sintiendo que algo andaba mal, Berenice exige franqueza y Antíoco le informa sobre la decisión de Tito. Ella no quiere creer y quiere aprender todo por sí misma del emperador. Antíoco ahora prohíbe acercarse a ella.
Antes de conocer a Berenice, Titus piensa qué hacer. Está solo siete días en el trono después de la muerte de su padre, y todos sus pensamientos no son sobre asuntos del gobierno, sino sobre el amor. Sin embargo, el emperador se da cuenta de que no se pertenece a sí mismo, es responsable ante el pueblo.
Berenice aparece y le pregunta si le dijeron la verdad. César responde que no importa cuán difícil sea para él tomar esa decisión, tendrán que irse. Berenice le reprocha: debería haber dicho sobre las leyes romanas cuando solo se conocían. Sería más fácil para ella negarse. Titus le responde a Berenice que no sabía cómo resultaría su destino, y no pensó que se convertiría en emperador. Ahora no vive, la vida se acabó, ahora reina. Berenice pregunta a qué le tiene miedo César: ¿levantamientos en la ciudad, en el campo? Titus responde que si las "costumbres del insulto del padre" provocan disturbios, entonces tendrá que forzar su elección, "y pagar el silencio de la gente", y no se sabe a qué costo. Berenice sugiere enmendar la "ley injusta". Pero Tito hizo un juramento a Roma "la ley de guardarlo", es su deber, "no hay otro camino, y debemos seguirlo inquebrantable". Uno debe mantener la palabra, como lo hicieron sus predecesores. Berenice, desesperada, reprocha a César por creer que es su deber supremo "cavar su tumba". Ella no quiere permanecer en Roma "una diversión para los romanos hostiles y malévolos". Ella decide suicidarse. Titus ordena a los sirvientes que sigan a Berenice y eviten que complete su plan.
La noticia de la ruptura de César con la reina se extiende por toda la ciudad: "Roma se regocija, cada templo está abierto a la gente". Antíoco, emocionado, ve que Berenice se apresura a "estar en un dolor inmenso" y necesita una daga y veneno.
Titus se encuentra con Berenice nuevamente, y ella le anuncia que se va. Ella no quiere escuchar cómo la gente se regodea. Titus le responde que no puede separarse de ella, pero que no puede rechazar el trono y abandonar al pueblo romano. Si lo hubiera hecho y se hubiera ido con Berenice, entonces ella misma se habría avergonzado de "una guerrera sin regimientos y César sin corona". El poder y el matrimonio con la reina son incompatibles, pero el alma del emperador ya no puede soportar tal tormento: está listo para morir si Berenice no le jura que no se hará cargo de sus manos.
Aparece Antíoco: durante mucho tiempo ocultó a César su amor por la reina, pero no pudo ocultarlo más. Al ver cómo sufren, él está listo por el bien de César y Berenice para sacrificar su vida a los dioses para que tengan misericordia, Berenice, "avergonzada" por la grandeza de las almas de ambos, al ver esa disposición a sacrificar a Tito y Antíoco, les ruega que no sufran tanto. para ella no vale la pena. La reina acepta vivir en separación y le pide a Titus que se olvide de ella. Ella llama a Antíoco para que se olvide del amor. El recuerdo de los tres permanecerá en los anales como un ejemplo del amor más tierno, ardiente y sin esperanza.